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BL21-Gold(DE3)pLysS菌株图片
产品货号:
YTC0404
中文名称:
BL21-Gold(DE3)pLysS菌株
英文名称:
产品规格:
200μL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

BL21-Gold(DE3)pLysS菌株是取在对数生长期的BL21-Gold(DE3)pLysS菌,加入含有甘油的细菌冻存液制备而成,可以直接划平板或小量、大量培养。本菌株来源于E.coli B,是BL21系列细胞的改进版,可同时用作蛋白表达菌株和质粒克隆菌株,同样适用于T7启动子调控目的基因表达的pET系列等原核表达质粒。本菌株可以使用常规的LB培养基或SOC培养基进行培养。


pLysS质粒编码产生的T7溶菌酶,是一种T7 RNA聚合酶抑制剂,能够有效降低目的基因的基础表达水平,严格控制毒性蛋白的表达,因此本菌株可少量表达对细菌有毒性或生长抑制的蛋白。pLysS质粒的起始复制起点是p15 Origin,这使得该质粒能够和pUC-以及pBR322-衍生的质粒互相共存。


BL21-Gold(DE3)pLysS,具有Hte表型,该表型有效增加了细胞的质粒转染效率;本菌株内的endonuclease I (endA)编码基因失活,可避免endA在大部分质粒小提时对质粒DNA的快速降解,因此本菌株可以产生高质量的小提DNA,直接用于扩增克隆蛋白表达构建质粒。


BL21-Gold(DE3)pLysS缺失位于细胞质中的Lon蛋白酶和胞外膜上的OmpT蛋白酶,能有效避免重组表达蛋白的降解,被广泛用作外源蛋白的表达菌株。


BL21-Gold(DE3)pLysS菌株具有四环素和氯霉素抗性。氯霉素抗性由pLysS质粒所携带。




BL21-Gold(DE3)pLysS菌株基因型:
E.coli B F- dcm+ Hte ompT hsdS(rB- mB-) gal λ(DE3) [pLysS Camr]a endA Tetr





  • 使用本甘油菌时可以不必完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加细菌的活力会逐渐下降。在没有结冻的情况下,菌体会逐渐沉淀至管底,请务必注意适当混匀后使用。
  • 为保证菌种纯正,避免其它细菌污染,尽量先划平板然后再挑单克隆菌落进行后续操作。
  • 本制品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
  • 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。



  • 划平板接种:
    取出BL21-Gold(DE3)pLysS甘油菌置于冰上,并置于超净台内,后续操作都在超净台内操作。
    • 用镊子和塑料枪头操作:镊子的顶端在70%酒精中蘸一下,并且在酒精灯上略略烧一下,使镊子的顶端处于无菌状态。用镊子夹取一个无菌的200μL塑料枪头,蘸取少量BL21-Gold(DE3)pLysS甘油菌,然后把蘸有菌液的塑料枪头,以尽量和LB或SOC平板接近平行的角度,在LB或SOC平板(含10μg/mL四环素和20μg/mL氯霉素)上连续作S形或Z形划动,再用一无菌的200μL塑料枪头,在原先的划线上以90°或120°角,再在LB或SOC平板上连续作S形或Z形划动。通常换枪头重复操作2~3次即可。37℃倒置培养过夜。
    • 用接种环操作:将接种环在酒精灯上略略烧一下,使接种环处于无菌状态。微冷后,蘸取少量BL21-Gold(DE3)pLysS甘油菌,在含10μg/mL四环素和20μg/mL氯霉素的LB或SOC平板上连续作S形或Z形划动。把接种环再烧一下,微冷后,在原先的划线上以90°或120°角,再在LB或SOC平板上连续作S形或Z形划动。通常用接种环重复操作2~3次即可。37℃倒置培养过夜。
  • 直接培养:
    BL21-Gold(DE3)pLysS甘油菌置于冰上,并置于超净台内,后续操作都在超净台内操作。把镊子的顶端在70%酒精中蘸一下,并且在酒精灯上略略烧一下,使镊子的顶端处于无菌状态。用镊子夹取一个无菌的塑料枪头或牙签,蘸取少量BL21-Gold(DE3)pLysS甘油菌,然后把蘸有菌液的塑料枪头或牙签放到装有3mL LB或SOC (含10μg/mL四环素和20μg/mL氯霉素)的细菌培养试管内或装有100mL或更大体积LB或SOC (含10μg/mL四环素和20μg/mL氯霉素)的细菌培养瓶内。37℃,约200rpm培养过夜。

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